Han medverkade i filmer som "Into the wild", "Wall Street" och "Alla presidentens män", i den sistnämnda gestaltade han den mystiske visselblåsaren "Deep throat", och blev Emmy- och Tony-belönad för sina insatser på scenen och tv.
Främst förknippades han med Mark Twain, som Holbrook porträtterade i en enmans-show under flera decennier. Enligt Variety spelade han föreställningen 2 200 gånger på scener över hela USA, inklusive på Broadway.
Vid två tillfällen spelade han president Lincoln, först i miniserien "Lincoln" (1976) och sedan igen i kultserien "Nord och syd" (1985 och 1986). Han medverkade också i Steven Spielbergs "Lincoln" (2012) men då i rollen som republikansk kongressman.
2008 resulterade hans prestation i filmen "Into the wild" i en Oscarsnominering. Den då 82-årige Holbrook var vid den tidpunkten den äldste man som fått ett sådant erkännande.
Hal Holbrook blev 95 år.