Döms ytterhögerpolitikern Bolsonaro kan det innebära att han hindras från att ställa upp i val under de kommande åtta åren.
Rättegången är omfattande och det är oklart hur länge den kommer att pågå.
Expresidenten misstänks bland annat för maktmissbruk och spridande av falska nyheter.
Han anklagas för att ha missbrukat statliga medier när han i juli 2022 – tre månader innan presidentvalet – sammankallade utländska diplomater till ett möte där han hävdade att Brasiliens elektroniska valsystem var mottagligt för bedrägerier.
Åklagarna hävdar att händelsen bröt mot vallagen, eftersom den hölls under valkampanjen.
Experter tror att Bolsonaro sannolikt kommer att förklaras skyldig. Bolsonaro själv tror detsamma, trots att han förnekar brott.
– Praktiskt taget alla säger att jag kommer att förlora, sade han till CNN Brasil i onsdags.
Enligt expresidentens pressekreterare följde Bolsonaro torsdagens rättegång från den sydliga staden Porto Alegre, där han också höll ett politiskt möte.
Om Bolsonaro fälls kan han överklaga till Brasiliens högsta domstol.